金黄色葡萄球菌FnBA活性基因的克隆及其原核表达

根据GenBank中纤连蛋白结合蛋白A基因(FnBA)序列设计了1对特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板,进行PCR扩增;结果获得了1 735 bp的DNA片段.将PCR产物克隆至pMD18-T载体中,成功地构建了克隆质粒pMD18-T-FnBA.以HindⅢ和BamH Ⅰ双酶切pMD18-T-FnBA和pET28a(+),将纯化的基因FnBA亚克隆至pET28a(+)中,构建了原核表达质粒pET28a-FnBA,并将其转化至E.coli BL21感受态细胞中,经1 mmol/L IPTG诱导和SDS-PAGE分析,在约85 000处出现了与预期目的蛋白一致的外源蛋白带.又经Western-blotting分析表明,该蛋白具有金黄色葡萄球菌的抗原性.     

鸡舍空气致病菌分离鉴定及其对消毒剂的敏感性观察

本试验研究金黄色葡萄球菌与大肠杆菌对河北省某地区规模化鸡舍空气的污染情况及其对消毒剂的敏感性。根据细菌分离培养特性、形态学、生化试验、动物试验和玻板凝集试验分离出7株金黄色葡萄球菌、6株致病性大肠杆菌（血清型为O15、O26、O93、O78）。经统计,金黄色葡萄球菌、大肠杆菌在规模化鸡舍空气中的检出率分别为63.6%、27.27%。应用滤纸片法测定其对消毒剂的敏感性,2种致病菌对消毒剂的敏感性差异较大,这表明规模化鸡舍空气受致病菌的污染程度不同,并且致病菌对消毒剂的敏感性有差异。     

石墨材料对黑曲霉和金黄色葡萄球菌生长的不同作用

向PDA培养基中加入膨胀石墨观察黑曲霉的生长,向牛肉膏蛋白胨培养基中加入膨胀石墨观察金黄色葡萄球菌的生长。结果发现:不加膨胀石墨的PDA培养基中黑曲霉菌落直径小于加入膨胀石墨的培养基中黑曲霉菌落直径。不加膨胀石墨的牛肉膏蛋白胨培养基中金黄色葡萄球菌落直径大于加入膨胀石墨的培养基中金黄色葡萄球菌落直径。证实在PDA培养基中膨胀石墨对黑曲霉生长有促进作用,而在牛肉膏蛋白胨培养基中膨胀石墨的加入对金黄色葡萄球菌的生长有抑制作用。     

犊牛腹泻病中沙门氏菌的分离与鉴定

近年来,随着新疆塔里木地区养牛业的迅速发展,奶牛头数的不断增多,犊牛腹泻的发病率也是呈上升趋势。从12头1月龄腹泻犊牛的粪样中进行细菌学分离27株菌株,其中分离得到5株沙门氏菌,药敏实验发现5株为沙门氏菌对诺氟沙星、环丙沙星极敏感,对阿莫西林产生耐药性,使用红霉素、庆大霉素时需要加大剂量。     

聚合酶链式反应(PCR)技术检测牛奶中金黄色葡萄球菌

根据金黄色葡萄球菌特异性STAA-Aul基因序列,设计、合成了一对引物,运用聚合酶链式反应(PCR)技术从10头患有奶牛乳房炎的奶牛奶样中扩增得到8个大小为420 bp的DNA产物;阴性样品中未扩增到产物。测定了其中2个DNA片段的核酸序列,确定为金黄色葡萄球菌的STAA-Aul基因。     

大通县城奶牛乳样中葡萄球菌的分离与鉴定

通过细菌分离培养法对大通县城奶牛乳汁样品36份进行金黄色葡萄球菌的分离，并采用金黄色葡萄球菌常规鉴定方法血浆凝固酶试验、甘露醇发酵试验和接触酶试验进行了鉴定，36份乳样中检出金黄色葡萄球菌阳性7份，阳性率为19．7％(7／36)。     

恩诺沙星和环丙沙星对金葡菌的抗菌后效应及抗菌后亚抑菌浓度效应

报告了抗菌后效应 (postantibiotic effect,PAE)、抗菌后亚抑菌浓度效应 (postantibiotic sub- MIC effect,PASME)、亚抑菌浓度效应 (sub- MIC effect,SME)研究的方法学和恩诺沙星、环丙沙星对金葡菌抗菌后效应及抗菌后亚抑菌浓度效应的研究结果。试验表明 :2、4MIC的恩诺沙星对金葡菌的 PAE为 1.0 3、1.5 0 h,1/2、1、2、4MIC的环丙沙星的 PAE为 0 .5 1、0 .88、1.47、1.92 h;1/8、1/4、1/2 MIC的恩诺沙星对经 4MIC药物诱导 1h的金葡菌可产生0 .38、1.15、>12 .31h的 PASME,1/8、1/4、1/2 MIC的环丙沙星的 PASME为 2 .6 9、>10 .17、>13.17h;1/8、1/4、1/2 MIC的恩诺沙星和环丙沙星对金葡菌产生的 SME分别为 0 .40、0 .91、>9.44 h和 0 .42、1.14、>9.0 2 h。上述结果说明 ,PAE、PASME和 SME的大小与药物浓度呈正相关 ,且环丙沙星比恩诺沙星对金葡菌有更长的效应     

金黄色葡萄球菌临床分离耐氟喹诺酮类药物株的gyrA和grlA基因突变

对 5株临床分离的耐氟喹诺酮类药物的金黄色葡萄球菌 (MIC值范围 :4～≥ 12 8mg/ L) ,提取各细菌染色体DNA,对 gyr A和 grl A基因进行 PCR扩增 ,产物与 p MD18- T载体连接 ,转化至大肠杆菌 JM10 9感受态细胞 ,筛选阳性克隆 ,测序。序列分析结果表明 ,5株菌均发生了基因突变。突变位点 grl A:Ser80 (TCC)→ Phe(TGC) ,Ser80 (TCC)→ Tyr(TAC) ;gyr A:Ser84 (TCA)→ L eu(TTA )、Ser84 (TCA)→ Ala(GCA)、Glu88(GAA)→ L ys(AAA) ,其中 2株对氟喹诺酮类药物的 MIC值低 (4～ 6 4 m g/ L) ,均发生 grl A单一点突变 ,其余 3株在 gyr A和 grl A上产生多突变位点 ,且对氟喹诺酮类药物的 MIC值较高 (8～≥ 12 8mg/ L )。说明单一的点突变只能引起低水平或中等水平的耐药 ,高水平的耐药需要多位点的突变。 5株耐药菌株均发生 grl A Ser80→ Tyr(Phe)点突变 ,提示环丙沙星、诺氟沙星等氟喹诺酮类药物作用于金黄色葡萄球菌的首要靶酶是拓扑异构酶 Iv     

A linear programming assessment of the profit from strategies to reduce the prevalence of Staphylococcus aureus mastitis

We used a linear programming model to estimate the financial returns to a Staphylococcus aureus testing and control program over a 1-year period for a 100-cow herd, with a 8636-kg rolling-herd average. Six tests, which vary in sensitivity from 0.80 to 0.98 and specificity of 0.99, were examined in simulated herds with 10, 20 and 30% prevalence of S. aureus infection. Sensitivity of these results to a range of assumptions regarding rolling-herd average, milk price, somatic cell-count premium, and cost and cure rate of dry treatment were examined to determine the profits from the program. The profits of a control program are most dependent upon prevalence, cell-count premium, and cost of dry treatment. In our simulation for a 100-cow herd, a testing and control program appears to cost less than US$10 per cow per year, and pays for itself within 1 yr, except under the lowest prevalence and most-adverse conditions (low yield, high cost of dry treatment, or low SCC premium).     

猪胴体淋巴结中金黄色葡萄球菌的分离与鉴定

随机采取西宁市某生猪屠宰场猪胴体淋巴结60份,进行细菌常规分离培养,结果分离出金黄色葡萄球菌菌株40株,表明该批猪胴体中的金黄色葡萄球菌带菌率可能较高,应引起有关部门的重视。